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REPUBLIQUE ALGERERIENNE DEMOCRATIQUE ET
POPULAIRE
Université Abdelhamid Ibn Badis
Mostaganem
Faculté des Science de la Nature et de la Vie
DEPARTEMENT DES SCIENCES DE LA MER ET DE
L’AQUACULTURE
TP: EXTRACTION DE LA CHLOROPHYLLE
Master 1 : Ressources Halieutiques
Module : Biochimie marine
Réalisé par :
FELLOUH TOUATI
1) INTRODUCTION
1-la chlorophylle absorbe les photons de la lumière et convertit l’énergie
lumineuse pour permettre la photolyse de l’eau et les oxydoréductions
2-Nous savons que les organismes chlorophylliens sont autotrophes pour le
carbone, c'est-à-dire capables de synthétiser des substances organiques à
partir de substances minérales
...
Chez les organismes
photosynthétiques, l'utilisation de l'énergie lumineuse est rendue possible
par l'existence de pigments, molécules organiques ou minérales insolubles
dans l’eau et solubles dans les solvants organiques capables d'interagir
spécifiquement avec certaines longueurs d'onde de la lumière
...
Extraction, identification et dosage De Chlorophylle par spectrophotométrie
3) Principe de l’experience:
l'extraction de la chlorophylle des vegetaux permet d'obtenir une solution
chlorophyllienne qui va servir a realiser la suite des manipulations du
protocole
...
A partir d'une solution chlorophyllienne, on peut donc mesurer les
caractéristiques d'absorption de la lumière en réalisant un spectre
d'absorption à l'aide d'un spectrophotomètre UV visible , qui permet de
mesurer l'absorption en fonction de la longueur d'onde
...
Spectre d’absorption de la chlorophylle
4) materiels et produits utulise:
SALADE DE MER
MORTIER ET PILON
BALANCE
DU LABORATOIRE
BÉCHER
CENTRIFUGEUSSE
ACÉTONE
ÉPROUVETTE
SPECTOPHOTOMETRIE
TUBES
A CENTRIFUGER
5) Protocole expérimental :
I-extraction d’une solution de chlorophylle
1- Peser 1 gramme de salade de mer à travers la balance du laboratoire
2-Nous avons mis l’échantillon dans le mortier
...
On broie à sec les feuilles (destruction des parois cellulaires)
4
...
5-Versez le contenu du mortier dans un tube
et placez-le dans la centrifugeuse pendant
10 minutes
...
II-la spectrophotométrie
1- Observer la lumière blanche avec un spectrophotomètre
2-Observer la solution de chlorophylle A et B et Nous entrons les données
dans l’appareil: longueur d’onde pour A et B :
CUVETTE
longueur d’onde
6) expression du resultats
puisqu'il s'agit des feuilles vertes (siège de la photosynthese)
...
388 lux
Pour la chlorophylle B 0
...
7 x (A663) - 2
...
7 x (0
...
69 x (0
...
195 (mg/g)
Chl b (mg/g) =[22
...
68 x (A663)] x
V
3
10 x W
Chl a (mg/g) =[22
...
381) – 4
...
388)] x
50
1000 x 1
Chl b =0
...
2 x (A645) +8
...
2 x (0
...
02 x (0
...
54 (mg/g)
CONCLUSION
la chlorophylle absorbe le rayonnement lumineux à des taux divers, où
l’absorption est importante pour le rayonnement rouge et violet, moins
pour le reste du rayonnement et presque inexistante pour les rayons
verts