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ARTÍCULO

Rodríguez-Angeles G

DE REVISIÓN

Principales características y diagnóstico
de los grupos patógenos de Escherichia coli
Guadalupe Rodríguez-Angeles, M en C
...

Principales características y diagnóstico
de los grupos patógenos de Escherichia coli
Salud Publica Mex 2002;44:464-475
...
insp
...
html

Rodríguez-Angeles G
...

Salud Publica Mex 2002;44:464-475
...
insp
...
html

Resumen
Escherichia coli coloniza el intestino del hombre pocas horas después del nacimiento y se considera de flora normal,
pero hay descritos seis grupos de E
...
La bacteria se puede aislar e identificar tradicionalmente con base
en sus características bioquímicas o serológicas, pero también se pueden estudiar sus mecanismos de patogenicidad
mediante ensayos en cultivos celulares o modelos animales
y, más recientemente, empleando técnicas de biología molecular que evidencian la presencia de genes involucrados
en dichos mecanismos
...
coli
como patógeno capaz de causar casos aislados o brotes de
diarrea, síndrome urémico hemolítico, colitis hemorrágica y
cuadros de disentería, principalmente en niños; por esto es
necesario conocer mejor a la bacteria y mantener la vigilancia epidemiológica
...
insp
...
html

Abstract
Escherichia coli colonizes the human intestinal tract within
hours of birth and is considered a non-pathogenic member
of the normal intestinal flora
...
E
...
The pathogenic mechanisms may be studied in cell cultures and animal model
assays, as well as more up to date molecular biology methods
for study and diagnosis
...
The objective of the present
work is to draw attention to the importance of E
...
This microorganism is an etiologic
agent of sporadic cases of diarrhea, hemorrhagic colitis,
dysentery, and hemolytic uremic syndromes and outbreaks
...
coli manifestations occur mainly among infants,
and deep knowledge and understanding of this microorganism are crucial to better epidemiologic surveillance
...
México, D
...
, México

Fecha de recibido: 5 de marzo de 2002 • Fecha de aprobado: 17 de abril de 2002
Solicitud de sobretiros: Maestra Martha Guadalupe Rodríguez-Angeles
...
Prolongación Carpio 470, Colonia Santo Tomás,
Delegación Miguel Hidalgo, 11340 México D
...
, México
...
telecom
...
mx, magraa_1999@yahoo
...
44, no
...
1-3 Esta bacteria
coloniza el intestino del hombre pocas horas después
del nacimiento y se le considera un microorganismo
de flora normal, pero hay cepas que pueden ser patógenas y causar daño produciendo diferentes cuadros
clínicos, entre ellos diarrea
...
El antígeno “O” es el responsable
del serogrupo; la determinación del antígeno somático
y flagelar (O:H) indica el serotipo, el cual en ocasiones
se asocia con un cuadro clínico en particular
...
2-5
La serotipificación de E
...
Como hay pocos laboratorios
que la realizan, se prefiere identificar las cepas mediante sus factores de virulencia empleando ensayos
in vitro como por ejemplo ensayos de adherencia en
células Hep-2 y ensayos de toxigenicidad en células
...
En el cuadro
III se muestran algunos métodos de estudio de los diferentes grupos patógenos o patotipos de E
...
1,2,4
Con base en su mecanismo de patogenicidad y
cuadro clínico, las cepas de E
...
1,2,4

E

E
...
Sus genes
están en un plásmido que también puede tener información genética para los CFA´s, aunque algunos genes
salud pública de méxico / vol
...
5, septiembre-octubre de 2002

ARTÍCULO

DE REVISIÓN

Cuadro I

IDENTIFICACIÓN

BIOQUÍMICA DE

Prueba bioquímica

E SCHERICHIA

COLI

% de positividad

Oxidasa
Producción de indol
Rojo de metilo
Voges-Proskauer
Citrato de Simmons
H2S (TSI)
Hidrólisis de urea
Utilización de malonato
Acido de glucosa
Gas de glucosa
Fenilalanina desaminasa
Lisina descarboxilasa
Arginina dihidrolasa
Ornitina descarboxilasa
Movilidad a 36 °C
Hidrólisis de gelatina a 22 °C
KCN crecimiento en
Fermentación de lactosa
Fermentación de la sacarosa
Fermentación de D-manitol
Fermentación de D-sorbitol
Fermentación de mucato
Fermentación de dulcitol
Fermentación de salicina
Fermentación de adonitol
Fermentación de inositol
Fermentación de L-arabinosa
Fermentación de la rafinosa
Fermentación de L-ramnosa
Fermentación de maltosa
Fermentación de D-xilosa
Fermentación de trealosa
Fermentación de celobiosa

0
98
99
0
1
1
1
0
100
95
0
90
17
65
95
0
3
95
50
98
94
95
60
40
5
1
99
50
80
95
95
98
2

Fermentación de a -metil-D glucósido
Fermentación de eritritol
Hidrólisis de la esculina
Fermentación de melobiosa
Fermentación de D-arabitol
Fermentación de D-manosa
Fermentación de glicerol
Nitrato a nitrito
Tartrato de Jordán
Utilización de Acetato
Lipasa (aceite de maíz)
DNasa a 25 °C
ONPG

0
0
35
75
5
98
75
100
95
90
0
0
95

Modificado de: Farmer III JJ3

465

ARTÍCULO

Rodríguez-Angeles G

DE REVISIÓN

Cuadro II

S EROTIPOS
ETEC
O6:HO6:H16
O8:HO11:H27
O15:H11
O20:HO25:HO27:HO27:H7
O27:H20
O80
O85:H7
O114:H21
O115:H21
O126:H9
O128ac:H27
O139
O148:H28
O149:H4
O149:H10
O153:H45
O159:HO159:H4
O159:H20
O166:H27
O167:H5
O169:H41
O173:H-

EIEC
O28ac:HO29:HO112ac:HO124:HO124:H7
O124:H30
O135:HO143:HO144:HO152:HO167:H5

Y SEROGRUPOS MÁS COMUNES DE

EPEC
O18
O26:HO26:H11
O55:HO55:H6
O55:H7
O86:HO86:H34
O111:HO111ab:H2
O119:H6
O125ac:H21
O126:HO126:H2
O126:H27
O127:H21
O128ab:H2
O128:H12
O142:H6
O158:H23

ETEC E
...
coli enteroinvasiva
NT: no tipificable
...
coli enteropatógena

EAEC
O3:H2
O15:H18
O44:H18
O77:H18
O86:HO111:H21
O127:H2
ONT:H10

ESCHERICHIA

COLI CAUSANTE DE DIARREA

STEC
O1:MN
O1:H1
O1:H2
O1:H20
O1:HNT
O2:H1
O2:H2:K1
O2:H6
O2:H7
O2:H27
O4:H40
O5:HO5:H16
O6:HO6:H1
O6:H29
O8:HO8:H14
O8:H21
O9ab:HO11:H49
O14:HO15:HO15:H27
O16:HO16:H6
O17:H18
O18:HO18:H?
O20:H7
O21:H5
O22:HO22:H1
O22:H8
O22:H40

O23:H7
O23:H16
O25:HO25:H11
O26:HO26:H2
O26:H8
O26:H11
O26:H21
O26:H32
O27:HO39:H4
O39:H8
O45:HO45:H2
O45:H7
O50:HO55:HO55:H6
O55:H7
O55:H10
O55:H?
O60:HO65:H16
O70:H11
O73:H34
O75:HO75:H5
O76:H19
O79:H7
O80:HO82:HO82:H8
O83:H1
O84:H2

O85:H10
O85:H23
O86:H10
O88:HO91:HO91:H10
O91:H14
O91:H21
O98:HO98:HO98:H8
103:HO103:H2
O103:H4
O103:H6
O103:H25
O104:H7
O109:H2
O110:HO110:H19
O111ab:HO111:H2
O111:H7
O111ab:H8
O111:H34
O111:HNT
O112:H21
O113:H2
O113:H4
O113:H53
O114:H4
O114:H48
O115:H18
O116:H19
O117:H-

O117:H7
O117:H7:K1
O117:H14
O117:H19
O118:H16
O118:H30
O119:HO119:H5
O120:H19
O121:HO121:H8
O126:HO126:H2
O126:H8
O126:H21
O126:H27
O128:H12
O137:H41
O141:HO144:HO145:HO145:H16
O145:H25
O145:H28
O146:HO146:H21
O146:H28
O150:H10
O153:H2
O153:H25
O154:HO157:HO157:H7
O161:HO163:H19

O165:HO165:H10
O165:H19
O165:H25
O166:H15
O166:H28
O168:HO169:HO171:H2
O172:HOX3:H2
ONT:H21
ONT:H25
ONT:H28
ONT:H47
OR:HOR:H20
OR:H21

EAEC E
...
coli productora de toxina shiga

Modificado de: Bopp C et al1, Eslava C et al,2 Nataro J et al4 y World Health Organization5

de ST se han encontrado en transposones
...
9
Las ETEC son importantes en lactantes, principalmente en niños menores de dos años, y en particular
durante los primeros seis meses de vida
...
coli en
niños con diarrea es de 10 a 30%
...
La enfermedad tiene un periodo de incubación de 14 a 50 h
...
La diarrea producida

466

salud pública de méxico / vol
...
5, septiembre-octubre de 2002

Características y diagnóstico de grupos patógenos de Escherichia coli

Cuadro III

P RUEBAS PARA

EVIDENCIAR EL MECANISMO

DE PATOGENICIDAD DE

ESCHERICHIA

COLI

CAUSANTE DE DIARREA

Grupo

Mecanismo de patógeno

ETEC

Enterotoxinas LT y ST

Pruebas
Asa ligada de conejo para LT
Efecto citopático en células
CHO, VERO y Y1 para LT
Ratón lactante para ST
RIA para ST
ELISA para LT y ST
Hibridación en fase sólida “colony
blot” con sondas específicas LT
y ST
PCR (ST y LT)

EHEC

Citotoxinas STX1 y STX2

Serotipificación
Efecto citopático en células Vero,
HeLa causado por STX
ELISA
Aglutinación en látex
Inmunofluorescencia
Separación inmunomagnética
Extracción de plásmido
Hibridación
PCR (eae, SLTI, SLTII, plásmido
pO157)
Campos pulsados
Fagotipificación

EIEC

Invasividad

Prueba de Sereny en cobayo
Invasividad en células HeLa
Captación de rojo congo
Extracción de plásmido
de 140 MDa
ELISA para el gene ipaC necesario
para la invasión
Hibridación con sondas derivadas
del plásmido pInv
PCR para genes ial, ipaH

EPEC

Adherencia localizada

Adherencia localizada en células
Hep-2 y HeLa
Prueba de FAS
Plásmido EAF
Hibridación (EAF, Bfp)
PCR (EAF, Bfp)

EAEC

Adherencia agregativa

Adherencia agregativa en células
Hep-2 y HeLa
Plásmido de 65 MDa
Hibridación con sonda obtenida
del plásmido de65 MDa
PCR (plásmido)

DAEC

Adherencia difusa

Adherencia difusa en células
Hep-2 y HeLa
Hibridación con sonda para la
fimbria F1845

Modificado de: Eslava C et al2 y Nataro J et al4

salud pública de méxico / vol
...
5, septiembre-octubre de 2002

ARTÍCULO

DE REVISIÓN

por ETEC puede ser leve, breve y autolimitada pero
también puede ser grave
...
El cuadro III indica los métodos de diagnóstico
...
coli enterohemorrágica
Riley describió y relacionó a EHEC con brotes caracterizados por dolor abdominal, diarrea acuosa con sangre y poco o nada de fiebre, cuadro al que se le llamó
colitis hemorrágica (CH) y que era debido a la ingestión
de carne cruda o mal cocida
...
coli del serotipo O157:H7
...
coli productora de una citotoxina con actividad en células Vero, por lo que se le
llama verotoxina (VT), y a las cepas capaces de producirla se les denominó E
...
13
Además, se observó que la citotoxina se neutralizó con
antitoxina obtenida a partir de Shigella dysenteriae tipo
1, por lo que también se le llamó “shiga-like toxin” o
toxina semejante a shiga (SLT) o “shiga toxin” (STX), y
a las E
...
4,14
La capacidad toxigénica de las cepas es necesaria
para que el paciente desarrolle colitis hemorrágica y
diarrea con sangre, ya que la citotoxina STX es el principal mecanismo de patogenicidad de EHEC y su
síntesis está relacionada con la presencia del bacteriófago STX, que está insertado en el genoma
...
15 En las cepas EHEC aisladas, se han encontrado las variantes STX1 y STX2 que
son inmunológicamente diferentes, de tal manera
que se pueden aislar bacterias que sinteticen alguna
de las toxinas o ambas
...
Otro factor de patogenicidad es
el plásmido pO157, de 60 megadaltones (MDa), que
codifica para la enterohemolisina
...
Una es en función de la presencia de sus
467

ARTÍCULO

Rodríguez-Angeles G

DE REVISIÓN

Cuadro IV

CARACTERÍSTICAS DE

LOS GRUPOS DE

ESCHERICHIA

COLI CAUSANTES DE DIARREA

Grupo

Síntomas clínicos

Epidemiología

Serogrupos y serotipos más comunes

Factores de patogenicidad

ETEC

Diarrea aguda acuosa

Niños menores de dos años
y diarrea del viajero

O8:H9,
O15:H11, O20:H-, O25:H-O27:H7,O78:H12,
O148:H28, O159:H20

ST y LT
CFA

EHEC

SUH, CH, diarrea sin
sangre, dolor abdominal,
fiebre, vómito

Niños y adultos que la adquieren
por comer carne cruda o mal
cocida

O157:H7 O26:H11, O103:H2, O113:H21
O119,O128, O145

STX
A/E
Intimina
pO157

EIEC

Diarrea con moco y sangre
o diarrea acuosa, también se
presenta cuadro disentérico

Niños menores de seis meses

O28:H, O112ac:H-, O144:H-, O152:H-,
164:H-O167:H-

Invasividad
Plásmido de
140MDa

EPEC

Diarrea aguda, dolor abdominal,
vómito, fiebre baja

Niños menores de seis meses
hasta dos años

O55, O86, O142, O111:H- O127,

A/E, BFP
Plásmido EAF
de 50-70MDa

EAEC

Diarrea líquida, verde con moco, Recién nacidos y niños menores
sin sangre, diarrea persistente
de dos años
hasta 20 días

O44:H18

Fimbria AAFI y II
EASTI
Proteínas Pet y Pic
OMP
Plásmido de 60 MDa
Citotoxina

DAEC

Diarrea acuosa sin sangre

O126:H27

Fimbria F1845
OMP

LT= toxina termolábil
ST= toxina termo estable
CFA= factor de colonización antigénico
BFP= pili con forma rizada

Niños de 1 a 5 años

EAF= factor de adherencia de EPEC
OMP= proteína de membrana externa
STX= toxina shiga
EAST= toxina ST de cepas enteroagregativas

Modificado de: Eslava C et al2

factores de patogenicidad: a) cepas típicas cuando
tienen el fago, el plásmido de 60 MDa y presentan el
fenómeno de A/E, y b) cepas atípicas, cuando no producen lesiones de A/E y pueden presentar o no el plásmido de 60 MDa
...
coli O157:H7
...
E
...
5 También se ha logrado recuperar de frutas y
vegetales como lechuga, rábanos, alfalfa; además en
productos industrializados como mayonesa y jugos de
naranja y manzana no pasteurizados, aun cuando estos alimentos tengan un pH de 3
...
La transmisión de E
...
19-21 Hay estudios que sugieren la importancia de la mosca doméstica como vector en la transmisión de E
...

Estas cepas pueden ser sorbitol positivo, y sus serotipos son diferentes del O157:H7
...
El
cuadro clínico causado por las cepas no-0157 se caracteriza por diarrea acuosa con dolor abdominal y colitis hemorrágica
...
4,5

468

salud pública de méxico / vol
...
5, septiembre-octubre de 2002

Características y diagnóstico de grupos patógenos de Escherichia coli

El principal mecanismo de patogenicidad de las
cepas EHEC no-O157:H7 es la toxina STX; también
tienen el fenómeno de A/E y la presencia de pO157
...
Se cura o bien
llega hasta SUH
...
Las pruebas moleculares como RFLP,
hibridación, campos pulsados, PCR y RAPD-PCR pueden detectar hasta 102 UFC/0
...
23-25
Es importante el trabajo conjunto del laboratorio y
los epidemiólogos para la vigilancia y detección oportuna de E
...


ARTÍCULO

DE REVISIÓN

puro de la bacteria en un ojo de un cobayo en el cual
después de 24 a 96 h se produce una ulceración en el
ojo, pero también hay métodos inmunológicos y moleculares como se indica en el cuadro III
...
coli enteropatógena

El grupo EIEC y Shigella spp están relacionados genética y bioquímicamente ya que son descarboxilasa negativas, no móviles y lactosa negativas
...
4,26 La información genética para este
mecanismo está en loci del cromosoma y del plásmido, además de tener la capacidad de elaborar una o
más enterotoxinas que pudieran ser importantes en
la producción de diarrea
...
2,27,28
Los síntomas característicos en personas infectadas por EIEC son diarrea acuosa, con sangre y moco,
pero algunos casos sólo presentan diarrea, ésta en ocasiones es indiferenciable de la que produce ETEC
...
2,29
El diagnóstico de EIEC se hace por prueba in vivo
como la de Sereny, que es la inoculación de un cultivo

EPEC fue el primer grupo que se identificó serológicamente y se asoció con casos de diarrea en infantes, siendo la adherencia su principal factor de
patogenicidad
...
2,33 La adherencia está mediada por pilis o fimbrias
rizadas que se llaman Bfp (bundle-forming pilus)
cuya información genética está codificada en un plásmido de 50-70MDa denominado EAF (EPEC adherence factor) y de algunos genes cromosomales
...
2,4
En ensayos in vitro las cepas EPEC se caracterizan
por formar microcolonias en el citoplasma de las células Hep-2 y su estudio incluye factores de patogenicidad como el efecto A/E, presencia de plásmidos y
fimbrias
...
4,37
EPEC puede ocasionar brotes o casos aislados de
diarrea
...
También
puede aislarse en adultos enfermos y sanos, principalmente cuando hay un factor predisponente como
diabetes
...
Los reservorios de EPEC pueden
ser niños y adultos con o sin síntomas
...

El diagnóstico de EPEC incluye ensayos in vitro
en cultivos celulares y métodos moleculares como se
observa en el cuadro III
...
44, no
...
coli enteroinvasiva

ARTÍCULO

E
...
En estudios posteriores se encontró el fenotipo de adherencia
agregativa, caracterizada por autoaglutinación de las
bacterias entre sí y por ser inespecífica, porque las bacterias se adhieren a la superficie de las células Hep-2
y a la superficie del cubreobjetos libre de células
Hep-2
...

También se ha descrito la fimbria AAF/II inmunológicamente diferente a AAF/I y que está codificada por
el gene aafA; sin embargo, no todas las EAEC presentan estas fimbrias
...
La producción de moco puede estar relacionada con la capacidad de EAEC para colonizar persistentemente el intestino y causar diarrea
...
41,42
Eslava y colaboradores identificaron dos proteínas de alto peso molecular de cepas EAEC, aisladas de
niños que murieron de diarrea persistente
...
El
gene para una de estas proteínas se encontró en un
plásmido de 65 MDa y a la proteína se le dio el nombre
de Pet (plasmid-encoded toxin) la cual tiene la capacidad de producir efecto citopático en células Hep-2,
caracterizado por arredondamiento y desprendimiento
de las células así como contracción del citoesqueleto y
pérdida de fibras de actina
...
43-45
El sitio blanco de daño de EAEC puede ser la mucosa del intestino grueso y delgado, con un periodo de
incubación de menos de ocho horas y puede durar
hasta 18 o 20 días
...
En niños puede
470

Rodríguez-Angeles G

DE REVISIÓN

manifestarse con diarrea líquida, de color verde, con
moco, sin sangre, y que en ocasiones puede llegar a
ser severa y requerir rehidratación intravenosa
...
4,46,47 La prueba de referencia para el diagnóstico
de EAEC es la observación de la adherencia agregativa en células Hep-2 de cultivos bacterianos, previamente inoculados en medio Luria e incubados en
condiciones estacionarias y a 37 °C
...
36,48,49
E
...
coli de adherencia difusa, no forman
microcolonias cuando se adhieren a células Hep-2 (2)
...
50 Los genes que codifican para esta
fimbria se pueden encontrar en el cromosoma o en un
plásmido
...
51 Al realizar ensayos in vitro en células CaCo y Hep-2, las cepas DAEC
tienen la capacidad de inducir la formación de estructuras protuberantes, semejantes a dedos, las cuales
confieren protección a las bacterias, pero la presencia
de dichas estructuras no se ha demostrado in vivo
...
Los principales síntomas que se presentan son diarrea acuosa sin sangre y
sin leucocitos
...
La hibridación con sondas derivadas de un fragmento del gene daaC, que codifica
para la fimbria F-1845, también se ha empleado para
el diagnóstico pero puede presentar falsos positivos,
y el diagnóstico empleando PCR aún no se ha desarrollado
...
coli patógena
Para el aislamiento, la identificación y la caracterización de cepas de E
...
1,3,4
El método tradicional es el aislamiento de la bacteria, tomada directamente de materia fecal o con
salud pública de méxico / vol
...
5, septiembre-octubre de 2002

Características y diagnóstico de grupos patógenos de Escherichia coli

ARTÍCULO

DE REVISIÓN

hisopo rectal
...
Posteriormente se seleccionan de 5 a 10 colonias
típicas de E
...

En muestras provenientes de casos de diarrea con
sangre se deben seleccionar también cepas lactosa negativa que pudieran ser EIEC
...
Estas pruebas
se interpretan de acuerdo con el cuadro I
...
2,4,5
En los laboratorios y hospitales que cuentan con
antisuero polivalente A, B o C de EPEC se realiza la
prueba de aglutinación en niños con diarrea con moco
y sangre, especialmente menores de un año
...
Este agar se debe
considerar sólo como un medio de selección y nunca
como una forma definitiva de diagnóstico ya que no
todas las cepas sorbitol negativo son E
...
19,53,54
Para aumentar la posibilidad de aislar E
...
El medio SMAC se puede
hacer selectivo y diferencial si se adicionan cefaxima y
telurito que permiten el crecimiento de E
...
coli
...
4,5,21 En el laboratorio se debe tener cuidado con el
número de resiembras que se hacen a las cepas después del primoaislamiento, ya que la estabilidad de
la capacidad toxigénica de la bacteria varía de un microorganismo a otro y se pierde con un alto número
de pases, principalmente en los serotipos O2:H5 y
O73:H34 mientras que en las cepas O26:H11 es muy
estable
...
coli O157:H7, así como demostrar
la presencia de factores de virulencia como pO157, el
fenómeno de A/E o los genes involucrados, además
de la fagotipificación
...
coli se puede realizar por un modelo in
vitro que permita observar el efecto citopático en cultivo de células Vero (células de riñón de mono verde),
CHO (células de ovario de hamster chino) o HeLa (células de carcinoma cérvico-uterino) (2,55)
...

La toxina y las células se dejan en contacto hasta observar la aparición de un efecto citotónico (células
alargadas) en el caso de toxina LT o bien efecto citotóxico (células redondas y muertas) debido a la toxina55,56
STX
...
coli se puede hacer con métodos de biología
molecular, una de las herramientas de diagnóstico más
recientes, tal es el caso del uso de sondas para la hibridación en fase sólida como es el “colony blot”
...
57 Actualmente para E
...

El colony blot es la transferencia del DNA de una
colonia de bacterias a una fase sólida que puede ser
nylon, papel filtro o nitrocelulosa, para su posterior
hibridación
...
Después de este tiempo
se coloca la membrana de nylon sobre la superficie de
la placa con las colonias en crecimiento y se incuba
toda la noche
...
La hibridación se realiza con una sonda marca-

salud pública de méxico / vol
...
5, septiembre-octubre de 2002

471

ARTÍCULO

Rodríguez-Angeles G

DE REVISIÓN

da con digoxigenina, la cual es un fragmento de un
gene de virulencia específico, y se pone de manifiesto
empleando un anticuerpo antidigoxigenina conjugado a la enzima fosfatasa alcalina, cuyo sustrato es el
BCIP, y el NBT es el cromógeno que desarrolla un color
negro o café cuando se incuba la membrana a temperatura ambiente y en la oscuridad
...
coli
...
También puede ser materia fecal o alimentos implicados en brotes en los que se necesita
confirmar la presencia de E
...
La cepa se siembra

por estría y se incuba durante 24 h; a continuación se
resuspenden cinco colonias de bacterias en 0
...
De la suspensión se toma una alícuota para el
tubo donde se realiza la PCR
...

La síntesis in vitro del fragmento de DNA o amplificación se efectúa mediante cambios de temperatura en tres fases: una de desnaturalizacion, una de
hibridación y fase de alargamiento, cuyas condiciones
serán diferentes en función del gene que se desea amplificar
...
En esta
prueba se requiere una área destinada a la preparación
de las muestras para PCR y otra sólo para productos
de PCR, ya que se debe evitar posibles contaminaciones

Cuadro V

S ECUENCIAS

DE OLIGONUCLEÓTIDOS Y SONDAS EMPLEADAS EN EL DIAGNÓSTICO DE

ESCHERICHIA

COLI

Grupo*

Factor de virulencia

Secuencias de oligonucleótidos usadas en PCR‡

Secuencias de oligonucleótidos usadas como sondas‡

ETEC

STI

TTAATAGCACCCGGTACAAGCAGG
CTTGACTCTTCAAAAGAGAAAATTAC

GCTGTGAATTGTGTTGTAATCC
GCTGTGAACTTTGTTGTAATCC

STaII

TTGTCTTTTTCACCTTTCCC
ACAAGCAGGATTACAACACA

---LT

GGCGACAGATTATACCGTGC
CCGAATTCTGTTATATATGTC

GCGAGAGGAACACAAACCGG

eae

CAGGTCGTCGTGTCTGCTAAA
TCAGCGTGGTTGGATCAACCT

ACTGAAAGCAAGCGGTGGTG

STX1

TTTACGATAGACTTCTCGAC
CACATATAAATTATTTCGCTC

GATGATCTCAGTTGGGCGTTC

STX2

CCCAGTCACGACGTTGTA
TATACTATCGTGCGTTTCCA

TCTGAAACTGCTCCTGTGTA

EIEC

ial

CTGGATGGTATGGTGAGG
GGAGGCCAACAATTATTTCC

CCATCTATTAGAATACCTGTG

EPEC

EAF

CAGGGTAAAAGAAAGATGATAA
TATGGGGACCATGTATTATCA

TATGGGGACCATGTATTATCA

BFP

AATGGTGCTTGCGCTTGCTGC
GCCGCTTTATCCAACCTGGTA

GCTACGGTGTTAATATCTCTGGCG

plásmido

CTGGCGAAAGACTGTATCAT
CAATGTATAGAAATCGCTGTT

EHEC

EAEC

---

* Para el grupo DAEC aún no se ha descrito una sonda específica y sensible
‡
Las secuencias están escritas en la dirección 5´a 3´
LT= toxina termolábil
ST= toxina termo estable
BFP= pili con forma rizada

STX= toxina shiga
ial = fragmento del locus asociado a invasividad presente en pInv
EAF= factor de adherencia de EPEC

Modificado de: Nataro J et al4 y Rademaker CMA et al61
472

salud pública de méxico / vol
...
5, septiembre-octubre de 2002

Características y diagnóstico de grupos patógenos de Escherichia coli

con productos de PCR que puedan interferir en el resultado de la prueba y dar falsos positivos
...
4,61
En el InDRE desde 1993 se empezó la estandarización de métodos de biología molecular como “colony blot” y PCR los cuales desde 1996 se emplean con
fines diagnósticos y como apoyo a la vigilancia epidemiológica, para la caracterización de E
...
62
Los resultados obtenidos indican que el grupo más
frecuente es el enterotoxigénico (48%), seguido por el
enteroinvasivo (9%), el enteropatógeno (4%) y el enterohemorrágico (1%), del cual sólo se han aislado cepas no O157:H7
...
coli es mayor durante los meses húmedos y
calurosos y afecta principalmente a niños menores de
cinco años
...
63,64
La electroforesis de campo pulsado (pulsed-field
gel electrophoresis PFGE) es un método de biología
molecular que cada vez se emplea más con fines epidemiológicos, debido a que separan largos fragmentos
de DNA que se obtienen al digerir DNA genómico con
enzimas de restricción que realizan cortes poco frecuentes
...
coli, provenientes de casos
aislados y brotes, para establecer o descartar su posible
relación filogenética
...
coli, que
nos permita realizar en México el análisis, y determinar
la relación que hay entre las clonas patógenas
circulantes de este microorganismo, así como conocer
su importancia epidemiológica
...
coli O157:H7 que pueden ayudar en el análisis
...
coli
del serotipo O157:H7 para las cuales la vigilancia
salud pública de méxico / vol
...
5, septiembre-octubre de 2002

ARTÍCULO

DE REVISIÓN

epidemiológica debe ser permanente, sobre todo en regiones fronterizas y turísticas
...
coli como patógeno, en un cuadro de
diarrea, se debe tener presente su importancia como
agente causal de cuadros graves de diarrea principalmente en niños menores de cinco años y no sólo considerarla como una bacteria de flora normal
...
Boop CA, Brenner FW,Wells JG, Strockbine N
...
En: Manual of clinical microbiology
...
7thed Washington, D
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E d
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Press
...

2
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Cepas de Escherichia coli relacionadas
con la diarrea
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6
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Colonization factors of diarrheagenic E
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...
O´Brien A, GD LaVeck, MR Thompson, Formal SB
...
Production of
Shigella dysenteriae type 1-like cytotoxin by Escherichia coli
...

15
...
Shiga and Shiga-like toxins
...

16
...
Producción de
citotoxina tipo shiga (SLT)1 en cepas de Escherichia coli aisladas de niños
con diarrea en una comunidad rural
...


473

ARTÍCULO

DE REVISIÓN

Rodríguez-Angeles G

17
...
The role of the eae gene of enterohemorrhagic Escherichia coli in
intimate attachment in vitro and in a porcine model
...

18
...
Molecular analysis of the plasmid-encoded hemolysin of Eschericia coli O157:H7 strain 933
...

19
...
Escherichia coli O157:H7 clinical, diagnostic and epidemiological aspects of human infection
...

20
...
Escherichia coli O157:H7 infection in Colombia
...

21
...
Importancia de la vigilancia de un brote de Escherichia coli
...

22
...

Houseflies: Not simple mechanical vector of enteroheorrhagic Escherichia
coli O157:H7
...

23
...
Molecular characterization of the gene encoding H antigen in Escherichia
coli of a PCR-restriction fragment length polymorphism test for
identification of E
...
J Clin Microbiol
1997;35:1066-1070
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Preston MA, Johnsonson W, Khakhria, Borczyk A
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Sasakawa C, Kamata K, Sakai T, Murayama SY, Makino S, Yoshikawa M
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Infect Immun 1986;51:470-475
...
Frankel G, Riley L, Girón J,Valmassoi J, Friedmann A, Strocknine N et al
...

33
...
Adhesion of enteropathogenic
Escherichia coli to human intestinal enterocytes and cultured human intestinal mucosa
...

34
...
An inducible bundle-forming pilus of
enropathogenic Eschericia coli
...

35
...
A plasmid-encoded type IV fimbrial gene of enteropathogenic Eschericia coli associated with localized
adherence
...

36
...
An adhesive factor found
in strains of Escherichia coli belonging to the traditional infantile enteropathogenic serotypes
...

37
...

Enteropathogenicity markers in Escherichia coli isolated from infants with

acute diarrhoea and healthy controls in Rio de Janeiro, Brazil
...
Vial PA, Robins R, Lior H, Prado V, Kaper JB, Nataro JP et al
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Nataro JP, Deng Y, Maneval DR, German AL, Martin WC, Leviene MM
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Infeact Immun 1992;60:2297-2304
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Czeczulin JR, Balepur S, Hicks S, Philips A, Hall R, Kothary MH et al
...
Infect Immun
1997;65:4135-4145
41
...
Enteroaggregative
Escherichia coli elaborate a heat-stable enterotoxin demonstarable in an
in vitro intestinal model
...

42
...
Enteroaggregative Escherichia coli heat-stable enterotoxinis not restricted to enteroaggregative E
...
J Infect Dis 1996;173:1019-1022
...
Eslava C, Navarro-García F, Czeczulin JR, Henderson IR, Cravioto A,
Nataro JP
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Infect Immun 1998;66:3155-3163
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Villaseca JM, Navarro-García F, Mendoza-Hernández G, Nataro JP, Cravioto A, Eslava C
...
Infect and Immun
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...
Henderson Ir, Czeczulin J, Eslava C, Noriega F, Nataro JP
...
Infect Immun 1999;67:5587-5596
46
...
Enteroaggregative Escherichia coli associated
with an outbreak of diarrhoea in a neonatal nursery ward
...

47
...
Association of Escherichia coli Hep-2 adherence patterns with type and duration
of diarrhoea
...

48
...
A sensitive and
specific DNA probe to identify enteroaggregative Escherichia coli, a recently discovered diarrheal pathogen
...

49
...
Development of PCR for screening of enteroaggregative Escherichia coli
...

50
...
Molecular characterization of
a fimbrial adhesin, F1845, mediating diffuse adherence of diarrhea-associated
Escherichia coli to Hep-2 cells
...

51
...
1992
...
Infect Immun
1996;60:13-18
...
Poitrineau P, Forestier C, Meyer M, Jallat C, Rich C, Malpuech G et al
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J Clin Microbiol 1995;
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...
Ojeda A, Prado V, Martínez J, Arellano C, Borczyk A, Johnson W et al
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...
Ammon A, Petersen LR, Kar ch H
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...
Rodríguez-Angeles G
...
En: Diagnóstico de laboratorio de
infecciones gastrointestinales
...

México, Secretaría de Salud, 1994:369
...
44, no
...
Giono S, Rodríguez-Angeles G, Rodríguez MJ, Valdespino JL
...
coli por cultivo de células
Vero e hibridación en fase sólida (Colony blot)
...

57
...
Diagnostic deoxyribonucleic acid probes for infectious
diseases
...

58
...
Evaluation of a technique for identification of Shiga-like toxin-producing Escherichia coli by
using polymerase chain reaction and digoxigenin-labeled probes
...

59
...
Efecto citotónico y citotóxico de la toxina colérica en células Vero y su relación con PCR
...

60
...
Detection of enterotoxigenic Escherichia coli after polymerase chain reaction amplification with a thermostable DNA polymerase
...

61
...
Digoxigenin labelled DNA probes for rapid detection of

enterotoxigenic and Vero cytotoxin producing Escherichia coli in faecal
samples
...

62
...
Identificación de cepas de Escherichia coli productoras de toxina termolábil (LT)
en células Vero y colony blot
...
II Congreso regional de la Asociación Internacional de Epidemiología 1994:106
...
Rodríguez G
...

Memorias IV Jornadas científico culturales de Químicos Clínicos
...
F
...

64
...
Escherichia
coli causante de diarrea en México, identificada por hibridación en fase
sólida colony blot
...
21
supl: S116
...
Arbeit RD, Arthur M, DunnR, Kim C, Selander RK, Goldstein R
...
J Infect Dis 161:230-235
...
44, no

---